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¢Â OligoÀÇ º¸°ü¹ý ¹× »ç¿ë¹æ¹ý

*Oligonuceotide´Â ÀϹÝÀûÀ¸·Î µ¿°á°ÇÁ¶µÈ pellet»óÅ·Π°ø±ÞµË´Ï´Ù.

À̰ÍÀº ¿î¼Û½Ã, ¿Âµµ µî ¿©·¯°¡ÁöÁ¶°Ç¿¡ ÀÇÇØ ÀϾ¼ö ÀÖ´Â ÇÕ¼ºµÈ DNAµéÀÇ ºÐÇØ¸¦ ¹æÁöÇϱâ À§ÇÔÀÔ´Ï´Ù.

DryµÈ ¿Ã¸®°í´Â ¶§¶§·Î ¿î¼Û°úÁ¤ ¹× ±âŸ»çÀ¯·Î tubeÀÌ ¶Ñ²±À» ¿©´Â¼ø°£ pelletÀÌ ½±°Ô ¼Õ½ÇµÉ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.

ƯÈ÷ LatexÀå°©µîÀ» ³¢°í ¶Ñ²±À» °³ºÀÇÏ¸é ¸¶Âû¿¡ ÀÇÇØ oligo¸¦ ¼Õ½ÇÇÒ °æ¿ì°¡ ¹ß»ýÇÕ´Ï´Ù.

µû¶ó¼­ tubeÀ» ¿­±âÀü¿¡ ¸ÕÀú Àá±ñ centrifuge¿¡ µ¹¸®½Ã°í tube¸¦ °³ºÀÇÏ¸é µË´Ï´Ù.

*ÀϹÝÀûÀ¸·Î oligo´Â -20¡É¿¡¼¼ 1³âÁ¤µµ ¾ÈÁ¤ÇÏ´Ù°í º¼¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.

OligoÁ¦Ç°À» ¼ö·ÉÈÄ ¸ê±ÕÁõ·ù¼ö·Î Àß ³ìÀÎÈÄ ¿©·¯ tube¿¡ º¸°üÇϽô°ÍÀÌ ¾ÈÀüÇÕ´Ï´Ù.

³Ãµ¿°ú ÇØµ¿À» ¹Ýº¹Çҽà oligoÀÇ ÀÌ»óÀÌ ¹ß»ýµÉ ¼ÒÁö°¡ ÀÖ½À´Ï´Ù.

¿ë¾×»óÅ·Πº¸°ü½Ã¿¡´Â ¸ê±ÕÁõ·ù¼öº¸´Ù TE(10mM Tri-HCl(Ph8.0), 1mM EDTA)buffer¿¡ ³ìÀ̴°ÍÀÌ ¿À·¡ º¸°üÇÒ ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.

 

¢Â µ¿ÀÏÇÑ OligoÇÕ¼º½Ã ¼­·Î ´Ù¸¥ OD°ª
OLIGOÇÕ¼º¿¡ »ç¿ëµÇ´Â Column³» CPG(controlled pore glass)ÀÇ ¾ç¿¡ µû¶ó ÇÕ¼ºµÇ´Â oligoÀÇ

yiled´Â ´Þ¶óÁý´Ï´Ù.

¿¹¸¦ µé¸é ¼ÒºñÀÚ°¡ 50nmol scale·Î ÁÖ¹®ÇÒ°æ¿ì ÇÕ¼º±âÀÇ column¾È¿¡´Â ÃÖ¼ÒÇÑ ÇÕ¼ºÀ» À§ÇÑ

3¡¯baseÀÇ ¾çÀÌ 50nmol ÀÌ»óÀÌ ¾çÀ» ³Ö°í ÇÕ¼ºÀ» ½ÃÀÛÇÕ´Ï´Ù.

50nmol scaleÀ̶õ ÇÕ¼º½Ã starting yieldÀ̸ç ÃÖÁ¾ ¾çÀÇ final yield¸¦ ÀǹÌÇϴ°ÍÀº ¾Æ´Õ´Ï´Ù.

* oligo ÇÕ¼º¼öÀ²À» °áÁ¤Áþ´Â ¿äÀÎ:

oligo size, coupling effcency, base Composition, Á¤Á¦¹æ¹ýµî ÀÔ´Ï´Ù.

¢Â TM(melting temperature)°ª

OligonucleotideÀÇ 50%´Â duplexÇüÅÂ, 50%´Â single-strandÇüŸ¦ Áö´Ò¶§ÀÇ ¿Âµµ¸¦ ¸»Çϸç,

oligonudleotideÀÇ sequence, oligonucleotideÀdzóµµ,±×¸®°í PCR¹ÝÀÀ½ÃÀÇ salt³óµµ µî¿¡ ÀÇÇØ
¿µÇâÀ» ¹Þ½À´Ï´Ù.

* TM°ªÀº Àý´ëÀûÀÎ °ªÀº ¾Æ´Õ´Ï´Ù.

½ÇÇèÀÚ°¡ Template¸¦ ÁغñÇÏ´Â °úÁ¤¿¡¼­ »ý±æ¼öÀÖ´Â ¿©·¯°¡Áö ºÒ¼ø¹°°ú saltµé¿¡ ÀÇÇØ ¿©·¯°¡Áö
º¯¼ö°¡ »ý±æ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.

µû¶ó¼­ ´ç»ç TM°ªÀ» Âü°í·Î ½ÇÇèÀ» ÇÏ½Ã°í ¸¸¾à ½ÇÇè°á°ú°¡ ³ª¿ÀÁö ¾ÊÀ»°æ¿ì ÇØ´ç TM°ªº¸´Ù 4-
5µµ ³·ÀºÁ¶°ÇÀ¸·Î ½ÇÇèÀ» ÇϽøé ÁÁ½À´Ï´Ù.

* ¸¸ÀÏ ±âÁØTM°ª¿¡¼­ Non-specific product°¡ ¸¹Àº °æ¿ì¿¡ annealing temperature¸¦ ³ô¿©°¡¸é
¼­ ½ÇÇèÁ¶°ÇÀ» ã¾Æ¾ß ÇÕ´Ï´Ù.

¢Â ÇÕ¼º Oligo°¡°Ý
 
ÇÕ¼ºscale
0.05umol
0.05umol
0.05umol
0.2umol
1.0umol
ÇÕ¼º¿°±â¼ö
~30mer
~40mer
~50mer
~99mer
~120mer
°¡°Ý/base
\ 650
\ 650
\ 750
\ 1000
\ 2,500
OPCÁ¤Á¦
¹«·á
¹«·á
¹«·á
¹«·á
¹«·á
PAGEÁ¤Á¦
\25,000
\25,000
\25,000
\25,000
\35,000
HPLCÁ¤Á¦
\30,000
\30,000
\30,000
\30,000
\50,000

*1ȸ 1,000merÀÌ»ó ÁÖ¹®½Ã 550/mer ÀÔ´Ï´Ù.

*1ȸ 200,000¿ø ÀÌ»ó ÁÖ¹®½Ã ¹®È­»óǰ±Ç 1¸Å ¹ß¼Û

*NO Setup charge(´Ü ÁÖ¹®¼ö·®ÀÌ 3column ÀÌÇÏ´Â Åùè¿ä±Ý 4,000¿ø ºÎ°¡)


**** 50mer ÀÌ»óÀÇ oligoÇÕ¼ºÀÇ °æ¿ì PAGE/HPLCÁ¤Á¦¸¦ ±ÇÇØµå¸³´Ï´Ù. ****

¢Â Modification Oligo List
5¡¯ Fluorescein 3¡¯ Fluorescein 5¡¯ Biotin 3¡¯ Biotin
5¡¯ Phosphate 3¡¯ Phosphate 5¡¯ Amine(C6) 3¡¯ Amine(C6)
5¡¯ TAMRA 3¡¯ TAMRA 5¡¯ Thiol(C6) 3¡¯ Thiol(C3)
5¡¯ Rhodamine 3¡¯ Rhodamine 5¡¯ Dig 3¡¯ Dig
5¡¯ FAM 5¡¯ HEX 5¡¯ TET 5¡¯ Texas Red
2¡¯- O - Methyl
Taqman Probe Phosphorothioate RNA
Inosine(dl)      
* ´ë·®ÇÕ¼º ¹× ±âŸ Modification oligo ´Â ¹®Àǹٶø´Ï´Ù.
 
R
A,G
W
A,T
S
C,G
D
A,G,T
B
C,G,T
N
A,C,G,T
Y
C,T 
M
A,C
K
G,T
H
A,T,C
V
A,C,G
I
Inosine

´ç»ç¿¡¼­´Â DNA¸¦ ÃâÇÏ Çϱâ Àü¿¡ ´ÙÀ½°ú °°Àº ½Ã½ºÅÛÀ» ÅëÇØ Á¦Ç°ÀÇ Ç°Áú °ü¸®¸¦ Çϰí ÀÖ½À´Ï´Ù.
1. PAGE¿¡ ÀÇÇÑ Ç°Áú°ü¸®

ÇÕ¼º DNA ÀÇ Àü Á¦Ç°À» PAGE¸¦ ÅëÇØ¼­ Á¦Ç° üũ¸¦ ÇÏ°í µ¥ÀÌÅ͸¦ ÷ºÎ Çϰí ÀÖ½À´Ï´Ù.
2. Áú·® ÃøÁ¤¿¡ ÀÇÇÑ Ç°Áú °ü¸® (MALDI-TOF/MS½Ã½ºÅÛ »ç¿ë)

TOF/MS ÃøÁ¤Àº ¿°±â¼ö°¡ 35mer ÀÌÇÏÀÇ Á¦Ç°¿¡ ÇÑÇØ¼­ ÃâÇϵǰí ÀÖ½À´Ï´Ù.

TOF/MS ÃøÁ¤Àº OPCÁ¤Á¦,HPLCÁ¤Á¦,PAGEÁ¤Á¦¸¦ ÇÏ°í ³ª¼­ ¿É¼ÇÀ¸·Î ¼±Åà ÇÏ½Ç ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.(TOF/MS µ¥ÀÌÅÍ,PAGE µ¥ÀÌÅÍ Ã·ºÎ)

»õ·Î¿î ½Ã½ºÅÛ¿¡ ÀÇÇÑ °íǰÁú °ü¸®
ÇÕ¼º½Ã¿¡ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Â ÃѺÐÀÚ·® ÀÌ·ÐÄ¡¸¦ ±âÁØÀ¸·Î ÇØ¼­ ½ÇÁ¦ ÇÕ¼ºÈÄÀÇ DNA¸¦ MALDI-TOF/MS (ºñÇà½Ã°£Çü Áú·®ÃøÁ¤ ½Ã½ºÅÛ)¸¦ »ç¿ë ÇØ¼­ ÃøÁ¤ÇØ ÃÑ ºÐÀÚ·®À» ºñ±³,È®ÀÎ ÇÏ°í ³­ÈÄ Á¦Ç°ÀÇ ÃâÇϸ¦ Çϰí ÀÖ½À´Ï´Ù.
Application TOF/MS-OPCÁ¤Á¦ TOF/MS-HPLCÁ¤Á¦ TOF/MS-PAGEÁ¤Á¦
DNA´ÜÆíÀÇ ÁõÆø ¡Û ¡Ý ¡Ý ¡Ý
¿ªÀü»ç ¹ÝÀÀ ¡Û ¡Ý ¡Ý ¡Ý
Probe ¡Û ¡Ý ¡Ý ¡Ý
Sequencing ¡Û ¡Ý ¡Ý ¡Ý
À¯ÀüÀÚ º¯ÀÌ µµÀÔ ¡Û ¡Ý ¡Ý ¡Ý
Hybridization ¡Û ¡Ý ¡Ý ¡Ý

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